Trong phòng sạch có hai nguồn gây ô nhiễm chính: các hạt bụi và vi sinh vật, có thể do các yếu tố con người và môi trường, hoặc các hoạt động liên quan trong quá trình sản xuất gây ra. Dù đã nỗ lực hết sức, ô nhiễm vẫn có thể xâm nhập vào phòng sạch. Các tác nhân gây ô nhiễm phổ biến bao gồm cơ thể người (tế bào, tóc), các yếu tố môi trường như bụi, khói, sương mù hoặc thiết bị (thiết bị phòng thí nghiệm, thiết bị làm sạch), và kỹ thuật lau chùi và phương pháp làm sạch không đúng cách.
Tác nhân gây ô nhiễm phổ biến nhất chính là con người. Ngay cả với trang phục bảo hộ nghiêm ngặt nhất và quy trình vận hành chặt chẽ nhất, những người vận hành không được đào tạo bài bản vẫn là mối đe dọa lớn nhất gây ô nhiễm trong phòng sạch. Nhân viên không tuân thủ các hướng dẫn về phòng sạch là một yếu tố rủi ro cao. Chỉ cần một nhân viên mắc sai lầm hoặc quên một bước nào đó, toàn bộ phòng sạch sẽ bị ô nhiễm. Công ty chỉ có thể đảm bảo sự sạch sẽ của phòng sạch bằng cách giám sát liên tục và cập nhật đào tạo thường xuyên với tỷ lệ ô nhiễm bằng không.
Các nguồn gây ô nhiễm chính khác là dụng cụ và thiết bị. Nếu xe đẩy hoặc máy móc chỉ được lau chùi sơ sài trước khi vào phòng sạch, chúng có thể mang theo vi sinh vật. Thường thì công nhân không biết rằng thiết bị có bánh xe sẽ lăn qua các bề mặt bị ô nhiễm khi được đẩy vào phòng sạch. Các bề mặt (bao gồm sàn nhà, tường, thiết bị, v.v.) được kiểm tra định kỳ về số lượng vi sinh vật sống bằng cách sử dụng các đĩa tiếp xúc được thiết kế đặc biệt chứa môi trường nuôi cấy như thạch đậu nành Trypticase (TSA) và thạch dextrose Sabouraud (SDA). TSA là môi trường nuôi cấy vi khuẩn, còn SDA là môi trường nuôi cấy nấm mốc và nấm men. TSA và SDA thường được ủ ở các nhiệt độ khác nhau, với TSA được ủ ở nhiệt độ trong khoảng 30-35˚C, đây là nhiệt độ tối ưu cho sự phát triển của hầu hết các loại vi khuẩn. Khoảng 20-25˚C là nhiệt độ tối ưu cho hầu hết các loài nấm mốc và nấm men.
Luồng không khí từng là nguyên nhân phổ biến gây ô nhiễm, nhưng hệ thống HVAC phòng sạch hiện đại đã gần như loại bỏ hoàn toàn ô nhiễm không khí. Không khí trong phòng sạch được kiểm soát và giám sát thường xuyên (ví dụ: hàng ngày, hàng tuần, hàng quý) về số lượng hạt, số lượng vi sinh vật sống, nhiệt độ và độ ẩm. Bộ lọc HEPA được sử dụng để kiểm soát số lượng hạt trong không khí và có khả năng lọc các hạt nhỏ đến 0,2µm. Các bộ lọc này thường được vận hành liên tục với tốc độ dòng chảy được hiệu chỉnh để duy trì chất lượng không khí trong phòng. Độ ẩm thường được giữ ở mức thấp để ngăn chặn sự phát triển của các vi sinh vật như vi khuẩn và nấm mốc ưa môi trường ẩm ướt.
Trên thực tế, nguồn gây ô nhiễm ở mức độ cao nhất và phổ biến nhất trong phòng sạch chính là người vận hành.
Nguồn gốc và đường xâm nhập của sự ô nhiễm không khác biệt đáng kể giữa các ngành công nghiệp, nhưng có sự khác biệt giữa các ngành về mức độ ô nhiễm có thể chấp nhận được và không thể chấp nhận được. Ví dụ, các nhà sản xuất viên nén uống không cần duy trì mức độ sạch sẽ như các nhà sản xuất thuốc tiêm được đưa trực tiếp vào cơ thể người.
Các nhà sản xuất dược phẩm có mức độ chịu đựng ô nhiễm vi sinh vật thấp hơn so với các nhà sản xuất điện tử công nghệ cao. Các nhà sản xuất chất bán dẫn, chuyên sản xuất các sản phẩm siêu nhỏ, không thể chấp nhận bất kỳ sự ô nhiễm dạng hạt nào để đảm bảo chức năng của sản phẩm. Do đó, các công ty này chỉ quan tâm đến độ vô trùng của sản phẩm được cấy ghép vào cơ thể người và chức năng của chip hoặc điện thoại di động. Họ tương đối ít quan tâm đến nấm mốc, nấm hoặc các dạng ô nhiễm vi sinh vật khác trong phòng sạch. Mặt khác, các công ty dược phẩm quan tâm đến tất cả các nguồn gây ô nhiễm, cả sinh vật sống và chết.
Ngành công nghiệp dược phẩm được FDA quản lý và phải tuân thủ nghiêm ngặt các quy định về Thực hành Sản xuất Tốt (GMP) vì hậu quả của việc nhiễm bẩn trong ngành dược phẩm rất nguy hiểm. Các nhà sản xuất thuốc không chỉ phải đảm bảo sản phẩm của họ không có vi khuẩn mà còn phải có tài liệu và theo dõi mọi thứ. Một công ty thiết bị công nghệ cao có thể vận chuyển máy tính xách tay hoặc TV miễn là nó vượt qua cuộc kiểm tra nội bộ. Nhưng đối với ngành dược phẩm thì không đơn giản như vậy, đó là lý do tại sao việc một công ty có, sử dụng và ghi chép các quy trình vận hành phòng sạch là rất quan trọng. Do cân nhắc về chi phí, nhiều công ty thuê các dịch vụ vệ sinh chuyên nghiệp bên ngoài để thực hiện việc làm sạch.
Một chương trình kiểm tra môi trường phòng sạch toàn diện cần bao gồm cả các hạt trong không khí có thể nhìn thấy và không thể nhìn thấy. Mặc dù không có yêu cầu bắt buộc phải xác định tất cả các chất gây ô nhiễm trong môi trường được kiểm soát này bằng vi sinh vật, nhưng chương trình kiểm soát môi trường cần bao gồm việc xác định vi khuẩn ở mức độ thích hợp đối với các mẫu chiết xuất. Hiện nay có rất nhiều phương pháp xác định vi khuẩn khác nhau.
Bước đầu tiên trong việc xác định vi khuẩn, đặc biệt là khi cần cách ly trong phòng sạch, là phương pháp nhuộm Gram, vì nó có thể cung cấp manh mối giúp xác định nguồn gốc ô nhiễm vi sinh vật. Nếu kết quả phân lập và xác định vi sinh vật cho thấy cầu khuẩn Gram dương, nguồn ô nhiễm có thể đến từ con người. Nếu kết quả phân lập và xác định vi sinh vật cho thấy trực khuẩn Gram dương, nguồn ô nhiễm có thể đến từ bụi hoặc các chủng kháng chất khử trùng. Nếu kết quả phân lập và xác định vi sinh vật cho thấy trực khuẩn Gram âm, nguồn ô nhiễm có thể đến từ nước hoặc bất kỳ bề mặt ẩm ướt nào.
Việc xác định vi sinh vật trong phòng sạch dược phẩm là rất cần thiết vì nó liên quan đến nhiều khía cạnh của đảm bảo chất lượng, chẳng hạn như thử nghiệm sinh học trong môi trường sản xuất; kiểm tra xác định vi khuẩn của sản phẩm cuối cùng; các sinh vật không xác định trong sản phẩm vô trùng và nước; kiểm soát chất lượng công nghệ bảo quản lên men trong ngành công nghệ sinh học; và xác minh thử nghiệm vi sinh trong quá trình thẩm định. Phương pháp của FDA để xác nhận khả năng tồn tại của vi khuẩn trong một môi trường cụ thể sẽ ngày càng phổ biến. Khi mức độ ô nhiễm vi sinh vật vượt quá mức quy định hoặc kết quả kiểm tra vô trùng cho thấy có sự ô nhiễm, cần phải xác minh hiệu quả của các chất làm sạch và khử trùng và loại bỏ việc xác định nguồn gây ô nhiễm.
Có hai phương pháp để giám sát bề mặt môi trường phòng sạch:
1. Tấm tiếp xúc
Các đĩa nuôi cấy đặc biệt này chứa môi trường nuôi cấy vô trùng, được chuẩn bị sao cho mực môi trường cao hơn mép đĩa. Nắp đậy của đĩa tiếp xúc bao phủ bề mặt cần lấy mẫu, và bất kỳ vi sinh vật nào nhìn thấy được trên bề mặt sẽ bám vào bề mặt thạch và phát triển. Kỹ thuật này có thể cho thấy số lượng vi sinh vật có thể nhìn thấy trên một bề mặt.
2. Phương pháp lấy mẫu bằng tăm bông
Que tăm bông được tiệt trùng và bảo quản trong dung dịch tiệt trùng thích hợp. Tăm bông được đặt lên bề mặt cần kiểm tra và vi sinh vật được xác định bằng cách thu hồi tăm bông trong môi trường nuôi cấy. Tăm bông thường được sử dụng trên các bề mặt không bằng phẳng hoặc ở những khu vực khó lấy mẫu bằng đĩa tiếp xúc. Lấy mẫu bằng tăm bông là một phương pháp kiểm tra định tính.
Thời gian đăng bài: 21 tháng 10 năm 2024