Có hai nguồn ô nhiễm chính trong phòng sạch: các hạt và vi sinh vật, có thể do yếu tố con người và môi trường gây ra hoặc các hoạt động liên quan trong quy trình. Bất chấp những nỗ lực tốt nhất, ô nhiễm vẫn sẽ xâm nhập vào phòng sạch. Các chất mang ô nhiễm phổ biến cụ thể bao gồm cơ thể con người (tế bào, tóc), các yếu tố môi trường như bụi, khói, sương mù hoặc thiết bị (thiết bị phòng thí nghiệm, thiết bị làm sạch) và kỹ thuật lau chùi cũng như phương pháp làm sạch không đúng cách.
Người mang mầm bệnh phổ biến nhất là con người. Ngay cả với trang phục nghiêm ngặt nhất và quy trình vận hành nghiêm ngặt nhất, những người vận hành được đào tạo không đúng cách vẫn là mối đe dọa lớn nhất gây ô nhiễm trong phòng sạch. Nhân viên không tuân thủ các nguyên tắc phòng sạch là yếu tố nguy cơ cao. Chỉ cần một nhân viên mắc lỗi hoặc quên một bước sẽ dẫn đến ô nhiễm toàn bộ phòng sạch. Công ty chỉ có thể đảm bảo độ sạch sẽ của phòng sạch bằng cách theo dõi liên tục và cập nhật đào tạo liên tục với tỷ lệ ô nhiễm bằng không.
Các nguồn ô nhiễm chính khác là dụng cụ và thiết bị. Nếu xe đẩy hoặc máy móc chỉ được lau sơ sài trước khi vào phòng sạch, nó có thể mang theo vi sinh vật. Thông thường, công nhân không biết rằng thiết bị có bánh xe sẽ lăn trên các bề mặt bị ô nhiễm khi được đẩy vào phòng sạch. Các bề mặt (bao gồm sàn, tường, thiết bị, v.v.) được kiểm tra thường xuyên về số lượng khả thi bằng cách sử dụng các tấm tiếp xúc được thiết kế đặc biệt chứa môi trường phát triển như Trypticase Soy Agar (TSA) và Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA là môi trường phát triển được thiết kế cho vi khuẩn và SDA là môi trường phát triển được thiết kế cho nấm mốc và nấm men. TSA và SDA thường được ủ ở các nhiệt độ khác nhau, trong đó TSA tiếp xúc với nhiệt độ trong khoảng 30-35˚C, đây là nhiệt độ tăng trưởng tối ưu cho hầu hết vi khuẩn. Khoảng 20-25˚C là tối ưu cho hầu hết các loài nấm mốc và nấm men.
Luồng không khí từng là nguyên nhân gây ô nhiễm phổ biến, nhưng hệ thống HVAC phòng sạch ngày nay hầu như đã loại bỏ ô nhiễm không khí. Không khí trong phòng sạch được kiểm soát và theo dõi thường xuyên (ví dụ: hàng ngày, hàng tuần, hàng quý) về số lượng hạt, số lượng khả thi, nhiệt độ và độ ẩm. Bộ lọc HEPA được sử dụng để kiểm soát số lượng hạt trong không khí và có khả năng lọc các hạt có kích thước nhỏ tới 0,2µm. Những bộ lọc này thường được chạy liên tục ở tốc độ dòng được hiệu chỉnh để duy trì chất lượng không khí trong phòng. Độ ẩm thường được giữ ở mức thấp để ngăn chặn sự phát triển của các vi sinh vật như vi khuẩn, nấm mốc ưa môi trường ẩm ướt.
Trên thực tế, nguồn gây ô nhiễm ở mức cao nhất và phổ biến nhất trong phòng sạch là người vận hành.
Nguồn và đường xâm nhập của ô nhiễm không khác biệt đáng kể giữa các ngành, nhưng có sự khác biệt giữa các ngành về mức độ ô nhiễm có thể chấp nhận được và không thể chấp nhận được. Ví dụ, các nhà sản xuất thuốc viên uống không cần duy trì mức độ sạch sẽ như các nhà sản xuất thuốc tiêm được đưa trực tiếp vào cơ thể con người.
Các nhà sản xuất dược phẩm có khả năng chịu đựng ô nhiễm vi khuẩn thấp hơn so với các nhà sản xuất điện tử công nghệ cao. Các nhà sản xuất chất bán dẫn sản xuất các sản phẩm cực nhỏ không thể chấp nhận bất kỳ ô nhiễm hạt nào để đảm bảo chức năng của sản phẩm. Vì vậy, các công ty này chỉ quan tâm đến tính vô trùng của sản phẩm được cấy vào cơ thể con người và chức năng của con chip hay điện thoại di động. Họ tương đối ít quan tâm đến nấm mốc, nấm mốc hoặc các dạng ô nhiễm vi sinh vật khác trong phòng sạch. Mặt khác, các công ty dược phẩm lại lo ngại về tất cả các nguồn ô nhiễm sống và chết.
Ngành dược phẩm được FDA quản lý và phải tuân thủ nghiêm ngặt các quy định Thực hành sản xuất tốt (GMP) vì hậu quả của ô nhiễm trong ngành dược phẩm là rất tai hại. Các nhà sản xuất thuốc không chỉ phải đảm bảo rằng sản phẩm của họ không có vi khuẩn mà còn phải có tài liệu và theo dõi mọi thứ. Một công ty thiết bị công nghệ cao có thể xuất xưởng máy tính xách tay hoặc TV miễn là nó vượt qua cuộc kiểm tra nội bộ. Nhưng điều đó không đơn giản đối với ngành dược phẩm, đó là lý do tại sao điều quan trọng đối với một công ty là phải có, sử dụng và ghi lại các quy trình vận hành phòng sạch. Do cân nhắc về chi phí, nhiều công ty thuê dịch vụ vệ sinh chuyên nghiệp bên ngoài để thực hiện dịch vụ vệ sinh.
Một chương trình thử nghiệm môi trường phòng sạch toàn diện nên bao gồm các hạt trong không khí nhìn thấy được và không nhìn thấy được. Mặc dù không có yêu cầu rằng tất cả các chất gây ô nhiễm trong môi trường được kiểm soát này phải được xác định bởi vi sinh vật. Chương trình kiểm soát môi trường phải bao gồm mức độ xác định vi khuẩn thích hợp trong quá trình chiết mẫu. Hiện nay có rất nhiều phương pháp định danh vi khuẩn.
Bước đầu tiên trong việc xác định vi khuẩn, đặc biệt là khi phân lập trong phòng sạch, là phương pháp nhuộm Gram, vì nó có thể cung cấp manh mối diễn giải về nguồn lây nhiễm vi khuẩn. Nếu phân lập và nhận dạng vi khuẩn cho thấy cầu khuẩn gram dương thì sự lây nhiễm có thể đến từ con người. Nếu quá trình phân lập và nhận dạng vi khuẩn cho thấy hình que Gram dương thì sự ô nhiễm có thể đến từ bụi hoặc các chủng kháng chất khử trùng. Nếu phân lập và nhận dạng vi sinh vật cho thấy các vi khuẩn gram âm thì nguồn ô nhiễm có thể đến từ nước hoặc bất kỳ bề mặt ẩm ướt nào.
Việc định danh vi khuẩn trong phòng sạch dược phẩm là rất cần thiết vì nó liên quan đến nhiều khía cạnh đảm bảo chất lượng, như xét nghiệm sinh học trong môi trường sản xuất; xét nghiệm định danh vi khuẩn của sản phẩm cuối cùng; sinh vật không tên trong sản phẩm và nước vô trùng; kiểm soát chất lượng công nghệ bảo quản quá trình lên men trong ngành công nghệ sinh học; và xác minh thử nghiệm vi sinh vật trong quá trình xác nhận. Phương pháp xác nhận vi khuẩn có thể tồn tại trong một môi trường cụ thể của FDA sẽ ngày càng trở nên phổ biến. Khi mức độ ô nhiễm vi sinh vật vượt quá mức quy định hoặc kết quả kiểm tra độ vô trùng cho thấy sự ô nhiễm, cần phải xác minh tính hiệu quả của các chất làm sạch và khử trùng và loại bỏ việc xác định các nguồn ô nhiễm.
Có hai phương pháp giám sát bề mặt môi trường phòng sạch:
1. Tấm tiếp xúc
Những đĩa nuôi cấy đặc biệt này chứa môi trường phát triển vô trùng, được chuẩn bị cao hơn mép đĩa. Tấm bìa tiếp xúc bao phủ bề mặt cần lấy mẫu và bất kỳ vi sinh vật nào nhìn thấy trên bề mặt sẽ bám vào bề mặt thạch và ủ. Kỹ thuật này có thể hiển thị số lượng vi sinh vật có thể nhìn thấy trên bề mặt.
2. Phương pháp gạc
Đây là chất vô trùng và được bảo quản trong chất lỏng vô trùng thích hợp. Miếng gạc được bôi lên bề mặt thử nghiệm và vi sinh vật được xác định bằng cách thu hồi miếng gạc trong môi trường. Gạc thường được sử dụng trên các bề mặt không bằng phẳng hoặc ở những khu vực khó lấy mẫu bằng tấm tiếp xúc. Lấy mẫu gạc là một thử nghiệm định tính hơn.
Thời gian đăng: Oct-21-2024