Có hai nguồn ô nhiễm chính trong phòng sạch: các hạt bụi và vi sinh vật, có thể do các yếu tố con người và môi trường, hoặc các hoạt động liên quan trong quá trình làm sạch gây ra. Dù đã nỗ lực hết sức, ô nhiễm vẫn có thể xâm nhập vào phòng sạch. Các tác nhân gây ô nhiễm phổ biến bao gồm cơ thể người (tế bào, tóc), các yếu tố môi trường như bụi, khói, sương mù hoặc thiết bị (thiết bị phòng thí nghiệm, thiết bị vệ sinh), và kỹ thuật lau chùi và phương pháp vệ sinh không đúng cách.
Con người là tác nhân gây ô nhiễm phổ biến nhất. Ngay cả với trang phục và quy trình vận hành nghiêm ngặt nhất, người vận hành không được đào tạo bài bản vẫn là mối đe dọa ô nhiễm lớn nhất trong phòng sạch. Nhân viên không tuân thủ các hướng dẫn phòng sạch là một yếu tố rủi ro cao. Chỉ cần một nhân viên mắc lỗi hoặc quên một bước, toàn bộ phòng sạch sẽ bị ô nhiễm. Công ty chỉ có thể đảm bảo phòng sạch luôn sạch sẽ bằng cách liên tục giám sát và cập nhật đào tạo với tỷ lệ ô nhiễm bằng 0.
Các nguồn ô nhiễm chính khác là các công cụ và thiết bị. Nếu xe đẩy hoặc máy móc chỉ được lau sơ qua trước khi vào phòng sạch, chúng có thể mang theo vi sinh vật. Thông thường, công nhân không biết rằng thiết bị có bánh xe lăn qua các bề mặt bị ô nhiễm khi được đẩy vào phòng sạch. Các bề mặt (bao gồm sàn, tường, thiết bị, v.v.) thường được kiểm tra số lượng vi khuẩn sống bằng cách sử dụng các đĩa tiếp xúc được thiết kế đặc biệt có chứa môi trường nuôi cấy như Trypticase Soy Agar (TSA) và Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA là môi trường nuôi cấy được thiết kế cho vi khuẩn, và SDA là môi trường nuôi cấy được thiết kế cho nấm mốc và nấm men. TSA và SDA thường được ủ ở các nhiệt độ khác nhau, trong đó TSA tiếp xúc với nhiệt độ trong khoảng 30-35˚C, đây là nhiệt độ nuôi cấy tối ưu cho hầu hết các loại vi khuẩn. Khoảng 20-25˚C là tối ưu cho hầu hết các loài nấm mốc và nấm men.
Luồng khí từng là nguyên nhân phổ biến gây ô nhiễm, nhưng hệ thống HVAC phòng sạch ngày nay đã gần như loại bỏ hoàn toàn ô nhiễm không khí. Không khí trong phòng sạch được kiểm soát và theo dõi thường xuyên (ví dụ: hàng ngày, hàng tuần, hàng quý) về số lượng hạt, số lượng vi khuẩn sống, nhiệt độ và độ ẩm. Bộ lọc HEPA được sử dụng để kiểm soát số lượng hạt trong không khí và có khả năng lọc các hạt có kích thước xuống đến 0,2µm. Các bộ lọc này thường được vận hành liên tục với lưu lượng được hiệu chuẩn để duy trì chất lượng không khí trong phòng. Độ ẩm thường được giữ ở mức thấp để ngăn ngừa sự phát triển của các vi sinh vật như vi khuẩn và nấm mốc ưa thích môi trường ẩm ướt.
Trên thực tế, nguồn gây ô nhiễm phổ biến và mức độ cao nhất trong phòng sạch chính là người vận hành.
Nguồn gốc và đường xâm nhập của ô nhiễm không khác nhau đáng kể giữa các ngành, nhưng có sự khác biệt giữa các ngành về mức độ ô nhiễm có thể chấp nhận được và không thể chấp nhận được. Ví dụ, các nhà sản xuất thuốc viên uống không cần phải duy trì mức độ sạch sẽ tương tự như các nhà sản xuất thuốc tiêm được đưa trực tiếp vào cơ thể người.
Các nhà sản xuất dược phẩm có khả năng chịu đựng ô nhiễm vi sinh vật thấp hơn so với các nhà sản xuất thiết bị điện tử công nghệ cao. Các nhà sản xuất chất bán dẫn sản xuất các sản phẩm siêu nhỏ không thể chấp nhận bất kỳ sự ô nhiễm hạt nào để đảm bảo chức năng của sản phẩm. Do đó, các công ty này chỉ quan tâm đến tính vô trùng của sản phẩm được cấy ghép vào cơ thể người và chức năng của chip hoặc điện thoại di động. Họ ít quan tâm đến nấm mốc, nấm hoặc các dạng ô nhiễm vi sinh vật khác trong phòng sạch. Mặt khác, các công ty dược phẩm quan tâm đến tất cả các nguồn ô nhiễm sống và chết.
Ngành dược phẩm được FDA quản lý và phải tuân thủ nghiêm ngặt các quy định về Thực hành Sản xuất Tốt (GMP) vì hậu quả của việc nhiễm bẩn trong ngành dược phẩm là rất nguy hại. Các nhà sản xuất thuốc không chỉ phải đảm bảo sản phẩm của họ không có vi khuẩn mà còn phải có tài liệu và theo dõi mọi thứ. Một công ty thiết bị công nghệ cao có thể xuất xưởng máy tính xách tay hoặc TV miễn là sản phẩm vượt qua được kiểm toán nội bộ. Tuy nhiên, điều này không hề đơn giản đối với ngành dược phẩm, đó là lý do tại sao việc sở hữu, sử dụng và ghi chép lại các quy trình vận hành phòng sạch là vô cùng quan trọng đối với một công ty. Do cân nhắc về chi phí, nhiều công ty thuê dịch vụ vệ sinh chuyên nghiệp bên ngoài để thực hiện dịch vụ vệ sinh.
Một chương trình kiểm tra môi trường phòng sạch toàn diện nên bao gồm cả các hạt lơ lửng hữu hình và vô hình. Mặc dù không có yêu cầu bắt buộc tất cả các chất gây ô nhiễm trong môi trường được kiểm soát này phải được xác định bằng vi sinh vật, chương trình kiểm soát môi trường nên bao gồm mức độ nhận dạng vi khuẩn phù hợp trong quá trình chiết xuất mẫu. Hiện nay có nhiều phương pháp nhận dạng vi khuẩn.
Bước đầu tiên trong việc định danh vi khuẩn, đặc biệt là khi phân lập phòng sạch, là phương pháp nhuộm Gram, vì nó có thể cung cấp manh mối giải thích về nguồn gốc nhiễm khuẩn. Nếu kết quả phân lập và định danh vi khuẩn cho thấy cầu khuẩn Gram dương, sự nhiễm khuẩn có thể đến từ con người. Nếu kết quả phân lập và định danh vi khuẩn cho thấy trực khuẩn Gram dương, sự nhiễm khuẩn có thể đến từ bụi hoặc các chủng kháng thuốc khử trùng. Nếu kết quả phân lập và định danh vi khuẩn cho thấy trực khuẩn Gram âm, nguồn nhiễm khuẩn có thể đến từ nước hoặc bất kỳ bề mặt ẩm ướt nào.
Việc định danh vi sinh vật trong phòng sạch dược phẩm là rất cần thiết vì nó liên quan đến nhiều khía cạnh của đảm bảo chất lượng, chẳng hạn như xét nghiệm sinh học trong môi trường sản xuất; thử nghiệm định danh vi khuẩn trên thành phẩm; sinh vật chưa được định danh trong sản phẩm vô trùng và nước; kiểm soát chất lượng công nghệ bảo quản lên men trong ngành công nghệ sinh học; và xác minh xét nghiệm vi sinh vật trong quá trình thẩm định. Phương pháp của FDA nhằm xác nhận khả năng tồn tại của vi khuẩn trong một môi trường cụ thể sẽ ngày càng phổ biến. Khi mức độ nhiễm khuẩn vượt quá mức quy định hoặc kết quả xét nghiệm vô trùng cho thấy có nhiễm khuẩn, cần phải xác minh hiệu quả của các chất tẩy rửa và khử trùng, đồng thời loại bỏ việc xác định các nguồn nhiễm khuẩn.
Có hai phương pháp để giám sát bề mặt môi trường phòng sạch:
1. Tấm tiếp xúc
Những đĩa nuôi cấy đặc biệt này chứa môi trường nuôi cấy vô trùng, được chuẩn bị cao hơn mép đĩa. Nắp đĩa tiếp xúc sẽ che phủ bề mặt cần lấy mẫu, và bất kỳ vi sinh vật nào nhìn thấy trên bề mặt sẽ bám vào bề mặt thạch và được ủ. Kỹ thuật này có thể hiển thị số lượng vi sinh vật nhìn thấy trên bề mặt.
2. Phương pháp tăm bông
Tăm bông được vô trùng và bảo quản trong dung dịch vô trùng phù hợp. Tăm bông được đặt lên bề mặt xét nghiệm và vi sinh vật được xác định bằng cách thu lại tăm bông trong môi trường. Tăm bông thường được sử dụng trên bề mặt không bằng phẳng hoặc ở những khu vực khó lấy mẫu bằng đĩa tiếp xúc. Lấy mẫu bằng tăm bông thiên về xét nghiệm định tính.
Thời gian đăng: 21-10-2024